Journal of Chromatography. A 1998 Apr 3; 802(1): 135-41

Roland Heynkes, 25.4.2003

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Schmerr,M.J.; Cutlip,R.C.; Jenny,A. - Capillary isoelectric focusing of the scrapie prion protein - Journal of Chromatography. A 1998 Apr 3; 802(1): 135-41

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Scrapie-assoziierte Fibrillen aus den Gehirnen von Schafen und Hamstern wurden in 0,01 M Tris-HCl (pH 8,00), 2 mM EDTA, 5% SDS und 10% Hexafluoroisopropanol durch 10-minütiges Kochen bei 100°C gelöst. Die Monomere wurden über eine hydrophil interagierende high-performance Säule chromatographisch gereinigt und anschließend konzentriert. Danach wurden die PrPsc-Monomere in 1% n-Octylglucosid gelöst und einer isoelektrischen Fokussierung in einer Kapillarsäule unterworfen. So fand man für die PrPsc aus den Gehirnen Scrapie-infizierter Schafe isoelektrische Punkte zwischen 5,2 und 3,00, mit einem Maximum bei 3,09. Die isoelektrischen Punkte des nomalen Prionproteins aus gesunden Schafhirnen lagen höher. Die aus Scrapie-infizierten Hamsterhirnen isolierten Prionproteine hatten isoelektrische Punkte zwischen 6,47 und 3,8.

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